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分享一些关于PCR板的相关知识点

更新时间:2023-04-17  |  点击率:134
  PCR板是一种在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。
 
  PCR板为什么一般都是PP材质的呢,为什么需要环境洁净?
 
  因为PCR板通常会与试剂或样品直接接触,而聚丙烯(PP)材质是生物学惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有着良好的化学耐性,及温度耐受性(可以121℃ 高压灭菌,也可以承受热循环过程中的温度变化)。
 
  这里强调一下耗材质量(是否干净)的重要性。PCR耗材必须保证没有污染物和抑制剂。高压和辐射能够去除细菌和DNA酶,但不能去除灰尘和DNA残留,它们可能会抑制PCR反应或产生非特异性扩增。
 
  物质是具有吸光度的,即便是很小的污染物也会吸收反应体系中的荧光,影响荧光信号的采集。因此,在生产这些塑料耗材时,从制模到最终的包装都必须在具有颗粒数量限制的设施环境中进行。
 

 

  不同颜色的PCR板,该怎么选呢?
 
  对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的,而彩色透明的PCR板更有助于进行样品分类管理。但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。由于qPCR需要实时定量检测荧光信号强度,更需要灵敏、精确的荧光信号传递。
 
  实验证明,与传统的透明PCR产品相比,白色PCR产品可大程度地反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,可优化实时荧光定量PCR的结果。
 
  那么PCR板有哪些优点呢?下面一起来看看吧。
 
  1、高热传递性
 
  1)极薄的壁厚优化热传递减少循环时间。
 
  之前买的PCR板/管材质厚度不一,是不是厚点的稳定性更好呢?
 
  不是的,管壁厚度会直接影响热传导率,极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。要想提升PCR反应效率,保证反应稳定高效进行,均一、超壁薄的PCR耗材才是佳选。
 
  2、高反射荧光信号
 
  1)qPCR更推荐使用优质的白色PCR耗材。
 
  2)管盖:高透光性,盖子的光通过率直接关系着仪器的信号采集,选择一款透光性高的盖子对荧光定量检测极其重要。
 
  3、高防污染性
 
  1)盖子要紧密,盖子与管子的适配性要好,可以减少交叉污染。
 
  2)PCR板要具有升孔缘,有利于密封。
 
  3)一端有手持条,联排盖一端要有突出的手持端,开盖减少污染。
 
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